柱層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡單的分離模式方便、簡單，但是洗脫時間長。減壓分離盡管能節省填料的使用量，但是由于大量的空氣通過填料會使溶劑揮發，并且有時在柱子外面會有水汽凝結，以及有些易分解的化合物也難以得到，而且還必須同時使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動速度，縮短樣品的洗脫時間，是一種比較好的方法，與常壓柱類似，只不過外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣，雙連球或者小氣泵等。

 

　　柱層析填料操作的一些建議：

　　1、使用前首先明確自己的分離目的，即要做哪一方面的分離，從而選擇合適的凝膠填料，尤其對于沒有成熟工藝的學生和研發人員，請大家務必查閱文獻或者詢問老師，同時根據自己的分離要求，選擇合適長度和直徑的層析柱；  

 

　　2、選擇好層析柱和填料以后，嚴格按照填料的要求來操作，包括填料的溶脹、脫氣、裝柱，期間務必嚴格按照說明書操作；

 

　　3、適當控制上樣量,上樣以前務必要過0.22µm濾膜；

 

　　4、選擇合適的流動相，根據膠的性質決定能否用泵加壓；

 

　　7、使用完畢后，請將層析柱做好處理，將層析柱堵好，以防干膠或者進氣泡，同時請做好試驗紀錄，以便下一位同學用時方便查詢使用情況；

 

　　8、試驗過程中所有用水或者溶液必須經過抽濾和脫氣，嚴防氣泡；

 

　　9、若在使用過程中發生意外情況。